FLIM系統(tǒng)構(gòu)成

TCSPC FLIM原理

熒光壽命與FLIM技術(shù)

熒光壽命是指分子在單線激發(fā)態(tài)所平均停留的時(shí)間。它不僅與物質(zhì)自身的結(jié)構(gòu)有關(guān)，而且與其所處微環(huán)境的極性、粘度等條件有關(guān)，因此通過(guò)熒光壽命測(cè)定可以直接了解物質(zhì)及所在體系發(fā)生的變化。熒光現(xiàn)象多發(fā)生在納秒級(jí)，正好是分子運(yùn)動(dòng)的時(shí)間尺度，因此測(cè)量熒光壽命可以“看”到許多復(fù)雜的分子間作用過(guò)程，例如超分子體系中分子間的簇集，固液界面上吸附態(tài)高分子的構(gòu)象重排、蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)的變化等。由于熒光壽命是所研究系統(tǒng)的固有特性，與細(xì)胞內(nèi)各處熒光探針的局部濃度無(wú)關(guān)，且不受光漂白和散射的影響，與熒光成像相比有更多優(yōu)勢(shì)。

FLIM-熒光壽命成像顯微，是將熒光壽命測(cè)量與激光掃描共聚焦顯微鏡等樣品掃描技術(shù)相結(jié)合的成像技術(shù)，通過(guò)掃描可以得到樣品各空間點(diǎn)熒光強(qiáng)度隨時(shí)間變化情況。

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FLIM應(yīng)用

?bh公司不只是將FLIM考慮成一種增加顯微圖像額外對(duì)比度的方法，更是將其考慮及設(shè)計(jì)為一種分子成像技術(shù)：bh FLIM技術(shù)利用了熒光團(tuán)的熒光衰減函數(shù)是其分子環(huán)境的指標(biāo)，以及多指數(shù)衰減分析提供了分子信息的特性，例如活細(xì)胞和組織的代謝狀態(tài)，蛋白質(zhì)構(gòu)象和蛋白質(zhì)相互作用，細(xì)胞對(duì)藥物和環(huán)境參數(shù)的反應(yīng)，以及癌癥發(fā)生和進(jìn)展的機(jī)制等。